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實驗室核酸檢測全流程
發(fā)布日期:2021/2/2 9:02:21

冬季以來,新冠疫情再次變成“常態(tài)”,各地出現(xiàn)不同程度和規(guī)模的疫情以來,每天都有成千上萬份等待進行檢測的新冠肺炎核酸樣本。這些樣本在實驗室是如何被檢測出來的?作為人類與新冠病毒戰(zhàn)斗的“第一戰(zhàn)場”的P3實驗室長什么樣?歐小博今日就帶你走進實驗室,揭秘核酸檢測全過程。

根據(jù)危險度等級,包括傳染病原的傳染性和危害性,國際上將生物實驗室將實驗室分為P1、P2、P3和P4四個等級。P1-4實驗室可承擔(dān)的工作也根據(jù)這一安全等級進行劃分,其嚴格等級從低到高。P3實驗室又稱防護實驗室,適用于處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危害性,通過直接接觸或氣溶膠使人傳染上嚴重甚至是致命的疾病,或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子,通常有預(yù)防和治療措施。

核酸檢測在實驗室內(nèi)是如何進行的?

大致可分為:檢測前的準(zhǔn)備工作——核對樣本信息——樣本滅活——開蓋加樣和核酸提取——PCR反應(yīng)體系配制——核酸擴增檢測——檢測完成——高壓滅菌。


檢測前

打開樣本前,檢測人員需穿戴好個人裝備防護裝備,如防護服、口罩、護目鏡、面屏、雙層醫(yī)用乳膠手套、防水靴套,每個步驟不能出錯。


測中

1、在實驗室核心區(qū)域內(nèi)使用75%酒精對送樣箱進行外表面消毒,消毒完畢后核對被檢測樣本的姓名、年齡、性別等信息進行核對。

2、將樣本放在水浴箱中進行半個小時的56℃的高溫滅活,使病毒蛋白失去生理活性,在不影響病毒蛋白基因序列的前提下,使病毒失去感染、致病和繁殖能力,保證檢測的安全性。


3、實驗員拿到滅活后的樣本時,第一步是進行振蕩,盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養(yǎng)基溶液中,第二步是進行5分鐘的沉淀。第三部進行開蓋加樣,這一步必須實行人工操作,并且需要兩人高度配合完成。一人擰開樣本罐的蓋子,另一人拿微量移液器在樣本罐中吸取微量溶液,放到另一個提取管里,再擰上管蓋。


核酸提取可以使用儀器輔助,但由于比對需要,往往要加以人工操作,需要反復(fù)進行離心、加試劑、洗滌等10多個步驟。其中,需要打開管蓋的操作就達7次以上,完成一例人工核酸提取需要50分鐘左右。

4、走出核心試驗區(qū),開始進行PCR反應(yīng)體系配制,將提取的病毒核酸加入到核酸擴增檢測試劑中。

5、將配制好的PCR反應(yīng)物放置在熒光定量PCR儀上。在電腦上設(shè)置PCR反應(yīng)條件,運行儀器,開始核酸擴增檢測。


檢測后


檢測人員需要實時關(guān)注檢測情況,約1.5小時后,核酸擴增完成,進行檢測結(jié)果判讀。至此,整個流程完成,大概4小時。

最后的,也是非常重要的一步就是對污染物的高壓滅菌處理。實驗過程產(chǎn)生的污染物通過高壓滅菌后,按普通醫(yī)療垃圾處理。
可以說,核酸檢測的過程也是與時間賽跑的過程。尤其是需要大規(guī)模進行核酸檢測的場景中,運輸?shù)街付ㄎ恢玫膶嶒炇疫M行檢測顯然要付出較高的時間成本??梢苿訉嶒炇业倪\用為提高核酸檢測效率提供了行之有效的方法。

移動PCR方艙實驗室,采用標(biāo)準(zhǔn)集裝箱體,運輸方便,機動性強,可重復(fù)利用的安全實驗室,采集完樣品后可就地進行檢測,減少了樣本流轉(zhuǎn)的時間,提高了檢測效率和準(zhǔn)確率。




移動pcr方艙實驗室具有模塊化設(shè)計,安裝集成度高,生產(chǎn)周期短,安裝快等優(yōu)點。移動PCR方艙實驗室可隨時配置于疫情發(fā)生的任何場所;可獨立于建筑之外,極大減小感染風(fēng)險及樣本流轉(zhuǎn)的時間,提高檢測精度;可快速部署,極大減小境外輸入風(fēng)險。