在實(shí)驗(yàn)室,人人都是「配槍」高手,
小小的移液器一抽一吸之間就能精確地量取溶液,
非常簡(jiǎn)單方便。
然而,這把形影不離的「槍」,
你真的會(huì)用TA嗎?
今天,讓我們嘮一嘮關(guān)于移液器精準(zhǔn)移液的知識(shí)。
正確使用
移液器包括以下幾個(gè)環(huán)節(jié):
1、設(shè)定體積
量程設(shè)定的原則是由大到小,所以在調(diào)節(jié)容量時(shí),如果要從大體積調(diào)為小體積,如200μL調(diào)為100μL,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕至所需要的容量即可;
但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí),則可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)調(diào)節(jié)旋鈕至超過目的容量值的1/4圈,再調(diào)至設(shè)定值,這樣可以使彈簧完全放開,排除機(jī)械間隙,使設(shè)定量值準(zhǔn)確,保證量取的精確度、延長(zhǎng)移液器的使用壽命。
需要注意的是,在該過程中,千萬(wàn)不要將按鈕旋出移液器的最大量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液器。
2、安裝吸頭
為保證良好的密封性,安裝吸頭前要選擇適配于移液器量程的吸頭。
移液器吸頭的安裝采用旋轉(zhuǎn)安裝法。掌心和四根手指握住槍柄,食指緊靠前端鉤狀結(jié)構(gòu),大拇指放在控制按鈕上,將移液器垂直插入吸頭,輕輕用力下壓的同時(shí),把手中的移液器左右旋轉(zhuǎn)半圈或順時(shí)針旋轉(zhuǎn)180°,上緊保證沒有空隙,否則試劑會(huì)漏出。此時(shí)需要注意,不要用力過大。
將吸頭套上移液器時(shí),很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯(cuò)誤的做法,具體原因如下:
①在撞擊的作用下,吸頭可能會(huì)變形而影響移液精度;
②移液器套柄接觸吸頭的部分經(jīng)過多次強(qiáng)力的摩擦,會(huì)逐漸變得粗糙而難以保證密封性, 而為了達(dá)到良好的密封性就需要更大的撞擊力,惡性循環(huán)就此開始;
③小量程的移液器的套柄都比較細(xì),在不斷撞擊的摧殘下,很有可能變成釣魚鉤;
④有時(shí)這種沖擊力比移液器掉在地上承受的力還要大,移液器里的部分精密部件隨時(shí)有不堪重負(fù)而罷工的可能。
3、潤(rùn)洗吸頭
在移液之前,為使測(cè)量準(zhǔn)確可以先吸放幾次液體以潤(rùn)洗吸頭,尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí)。
對(duì)于常溫樣品,吸頭潤(rùn)洗有助于提高準(zhǔn)確性;但是對(duì)于高溫或低溫樣品,吸頭潤(rùn)洗反而降低操作準(zhǔn)確性,所以高溫或低溫液體不要潤(rùn)洗吸頭,請(qǐng)使用者特別注意。
4、精準(zhǔn)移液
(1)移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度,溫度偏高或偏低都會(huì)影響移取的液體體積。
(2)吸取液體時(shí),移液器保持豎直狀態(tài),將移液器吸頭垂直浸入液面下1-6mm(具體視移液槍容量大小而定):0.1-10μL容量的移液器進(jìn)入液面下1-2mm; 2-200μL容量的移液器進(jìn)入液面下2-3mm; 1-5mL容量的移液器進(jìn)入液面下3-6mm。過多過少都不建議,伸入過多會(huì)造成移液管的外壁沾有過多溶液,移液時(shí)造成體積誤差;伸入太少在液面下降之后容易吸空,造成移液作廢。
(3)移液有兩種方法:
①正向移液:按動(dòng)移液器按鈕至第一停點(diǎn),輕緩松開按鈕到起始點(diǎn)完成吸液,輕按按鈕至第一停點(diǎn),排除液體;稍停片刻,繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn),排空液體,松開按鈕回到原點(diǎn)。如果需要,更換吸頭后繼續(xù)移液。
正向移液法適用于密度較低的溶液。
②反向移液:按動(dòng)移液器按鈕至第二停點(diǎn),輕緩松開按鈕到起始點(diǎn)完成吸液。吸取多于設(shè)定容量的液體,輕按按鈕至第一停點(diǎn),排除液體,殘留在吸頭內(nèi)的多余液體隨吸頭丟棄。
反向移液法適用于粘稠液體、揮發(fā)或易產(chǎn)生氣泡的溶液。
(4)緩慢取出槍頭,移液器移出液面前略等1-3秒;1000μL以下停頓1秒;5-10mL停頓2-3秒。確保槍頭外壁無(wú)液體。
5、卸去吸頭
按壓彈射鍵彈射出吸頭。
移液器用完后調(diào)回最大量程,以免壓縮彈簧導(dǎo)致彈簧不能恢復(fù)。
使用完畢,可以將其豎直掛在移液器架上,但要小心別掉下來(lái)。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí),切勿將移液器水平放置或倒置.以兔液體倒流腐蝕活塞彈簧。
注意事項(xiàng):
1、使用前需要先校正,一般三個(gè)月校正一次。如果使用不頻繁,可半年校正一次。校正方法可采用稱量校正,即20℃時(shí)1mL蒸餾水=0.9982g (需要用萬(wàn)分之一的電子分析天平)。
2、選擇合適量程的移液器,建議移液范圍在移液器量程的35%-100%內(nèi)。
3、一定要用與移液器相匹配的吸頭。
4、不要將按鈕旋出最大或最小量程范圍之外,否則會(huì)卡住機(jī)械裝置,損壞移液器。
5、不要傾斜移液。
有人以為適當(dāng)傾斜有助于吸液干凈,還更靈活,這是絕對(duì)錯(cuò)誤的。移液角度對(duì)準(zhǔn)確性有較大影響,保證吸液或排液時(shí)偏離垂直不可超過20°,否則影響準(zhǔn)確性。
6、嚴(yán)禁用移液器吹打混勻液體。
7、吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,吸液太快會(huì)產(chǎn)生氣泡,液體浸入移液器內(nèi)部造成內(nèi)部器件腐蝕。
8、使用過的槍頭不能和新吸頭混放,以免產(chǎn)生交叉污染。
9、定期清潔移液槍外壁,可以用95%酒精或60%的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干。
10、移液器如果需要消毒可以用紫外照,或者用75%酒精擦拭,切不可近火。
11、移液器存放時(shí)保持豎直存放,不要平放。在移液操作過程中,難免會(huì)有液體進(jìn)入移液器的內(nèi)部,在平放的狀態(tài)下,這些液體就會(huì)一直滯留在活塞等部件上,日積月累之后污染活塞甚至腐蝕活塞。
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